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  • .单选题
    • 请选择本实验所需的SD孕鼠?
      正确答案:孕15-17天
      答题解析:

      答案解析:A 孕鼠天数过小,胎鼠大脑体积过小,操作困难,海马组织结构发育不全,难以辨别;C 孕鼠天数过大,胎鼠大脑表面血膜难以剥离,海马与周边大脑组织边界不清晰。


    • 孕鼠麻醉所需的1%戊巴比妥钠溶液的用量为?
      正确答案:0.2mL/100g
      答题解析:

      答案解析:A 麻醉用量过小,手术中孕鼠容易清醒咬伤实验者;C 麻醉用量过大导致孕鼠死亡,血液凝固导致胎鼠脑缺血甚至死亡,影响提取的海马神经元的状态与生长。


    • 胎鼠提取过程的时间尽可能?
      正确答案:快
      答题解析:

      答案解析:活鼠取脑能保证神经细胞的活性,操作时间过长胎鼠容易死亡,使得神经细胞加速凋亡从而影响神经元状态


    • 从孕鼠腹腔提取出胎鼠后,应置于哪种溶液中?
      正确答案:75%酒精
      答题解析:

      答案解析: A、B两种溶液无法起到酒精的麻醉与消毒作用,未麻醉的胎鼠进行手术操作不符合动物伦理规范,未消毒的胎鼠表面含有大量细菌易造成细胞污染。D 95%酒精容易导致胎鼠提前死亡,使得海马神经元受损。


    • 剪下的胎鼠头部应该放置在含有哪种溶液的培养皿中进行清洗?
      正确答案:HBSS
      答题解析:

      答案解析:HBSS缓冲液与PAB缓冲液都可用于洗涤细胞,但HBSSPBS多了一些糖分,可用于保护细胞,D 75%的酒精的作用是杀菌


    • 放置胎鼠头部的培养皿应该放置在什么环境温度下?
      正确答案:冰盒上
      答题解析:

      答案解析:剪下的胎鼠头部应该减缓细胞的代谢和死亡,室温下细胞代谢和死亡速度较快,因此应该放置于温度低的冰盒上。


    • 细胞培养时,第三天应该加入多少微升的阿糖胞苷去除胶质细胞?
      正确答案:0.2
      答题解析:

      答案解析:未加入阿糖胞苷或加入阿糖胞苷的量过少,会导致胶质细胞过多,抑制神经元的生长;加入阿糖胞苷的量过多,则会导致神经元死亡。


    • 应加入哪种溶液对组织进行消化?
      正确答案:木瓜蛋白酶
      答题解析:

      答案解析:胰蛋白酶功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,改变细胞间的连接,使组织或细胞片分散成单个细胞; 木瓜蛋白酶相比于胰蛋白酶而言,它能分解相对于胰蛋白酶更多的蛋白质底物。初步消化选择0.25%的胰蛋白酶,木瓜蛋白酶用于进一步消化,剪碎海马组织后用木瓜蛋白酶进行进一步消化;A.HBSS不具有消化组织作用。


    • 加入哪种溶液终止消化?
      正确答案:种植液
      答题解析:

      答案:B.种植液的作用是终止消化洗去多余的木瓜蛋白酶,D是促进组织消化,A和C并没有终止组织消化的作用。


    • 第三天加入阿糖胞苷后,平均每隔(  )天使用神经元培养液进行半量换液,一直到第14天为止
      正确答案:2-3
      答题解析:

      答案解析:若换液间隔时间过短或者换液时未沿着侧壁,则细胞生长微环境的频繁改变会影响细胞生长;若换液间隔时间过长,则培养液中的营养成分不足,代谢产物会产生细胞毒性。


    • 加种植液、吹打、静置沉淀以及过滤四个步骤需要重复多少次?
      正确答案:3次
      答题解析:

      答案解析:若重复次数少于3次,则上清液的体积过少,获得的细胞数目减少;重复次数大于3次则吹打次数过多细胞易破损死亡。


    • 加入哪种溶液对组织进行初步消化?
      正确答案:0.25%的胰蛋白酶
      答题解析:

      答案解析:胰蛋白酶功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,改变细胞间的连接,使组织或细胞片分散成单个细胞; 木瓜蛋白酶相比于胰蛋白酶而言,它能分解相对于胰蛋白酶更多的蛋白质底物。初步消化选择0.25%的胰蛋白酶,木瓜蛋白酶用于进一步消化,剪碎海马组织后用木瓜蛋白酶进行进一步消化;A.HBSS不具有消化作用。


  • .简答题
    • 剪下的胎鼠头部未清洗血液会产生什么后果?
      正确答案:

      答案:剪下的胎鼠头部未清洗血液的话会使得血液与神经元共培养,竞争营养及空间。


      答题解析:

      答案:剪下的胎鼠头部未清洗血液的话会使得血液与神经元共培养,竞争营养及空间。


    • 如果血膜未剥离或未剥离干净会产生什么后果?
      正确答案:

      答案:血细胞与神经元共培养,竞争空间与营养


      答题解析:

      答案:血细胞与神经元共培养,竞争空间与营养


    • 用移液枪吸出培养皿中的HBSS倒入废液缸中时,未吸取或未吸净会产生什么影响?
      正确答案:

      答案:若HBSS未被吸取或者残余过多,则剩余的HBSS会稀释胰蛋白酶,减弱胰蛋白酶的消化作用,则获得的细胞数量减少


      答题解析:

      答案:若HBSS未被吸取或者残余过多,则剩余的HBSS会稀释胰蛋白酶,减弱胰蛋白酶的消化作用,则获得的细胞数量减少


    • 手术弯剪应对海马组织剪切多少次,次数过多过少会对组织的预消化产生什么影响?
      正确答案:

      答案:手术弯剪应对着海马组织剪3-4下,剪切次数过少的话,组织碎片过大不易消化,获得的细胞数量减少;剪切次数过多则部分组织碎片过小,难以沉降,获得的细胞数量减少。


      答题解析:

      答案:手术弯剪应对着海马组织剪3-4下,剪切次数过少的话,组织碎片过大不易消化,获得的细胞数量减少;剪切次数过多则部分组织碎片过小,难以沉降,获得的细胞数量减少。